Экспозиция расположена в четырех залах дома поэта и в музейном дворике.

Зал «Детство и юность И.С. Никитина»

Здесь представлены посуда и мебель середины XIX века, картины воронежских живописцев с образами сюжетов из детства поэта. Также отображена тема учёбы в семинарии, размещены стилизованные страницы книги с иллюстрациями повести Ивана Никитина «Дневник семинариста».

Мемориальная комната

В воссозданном интерьере XIX века представлены мебель и предметы, принадлежавшие Ивану Никитину, а также портреты его друзей и соратников по кружку Н.И. Второва. В витрине – сборники стихотворений Никитина, подшивка газеты «Воронежские губернские ведомости» за 1853 год, где впервые были опубликованы его стихи. За столом представлен образ поэта в виде манекена в момент сочинения письма редактору воронежской газеты.

Зал «Поэт и дворник»

В комнате и сенях отображена тема крестьянского и мещанского быта XIX века. Здесь расположен условный и внемасштабный макет усадьбы Никитина с постоялым двором, старинные предметы, а также первое издание поэмы «Кулак», графические иллюстрации к нему и картина В.В. Шаврина «Никитин на постоялом дворе».

Зал «Последние годы жизни и творчества И. С. Никитина. Сохранение памяти о поэте»

Здесь представлены книги и фрагменты изданий, продававшиеся в его магазине, литературные журналы с публикациями произведений поэта. Инсталляция «Роман в письмах» из женских аксессуаров и фрагментов писем посвящена влюбленности Ивана Никитина в дочь генерала Наталью Матвееву. Имя Никитина увековечено в истории Воронежа. В зале представлен авторский макет памятника скульптора И.А. Шуклина, открытого в 1911 году и акварель с изображением захоронения поэта М. Салтыкова, датированная 1918 годом.

Инсталляция «Постоялый двор купца Никитина»

Инсталляция находится во дворе музея и представляет собой деревянный навес с санями, телегой, конской упряжью, предметами быта постоялого двора и поодаль стоящих от строения стилизованного колодца с воротом, а также клетей для корма лошадей.